استخدام منظار البطن البيطري في جمع بويضات الأبقار في التخصيب في المختبر
استخدام منظار البطن البيطري في جمع البويضات في الإخصاب في المختبر.
معدل استعادة البويضات التي تم جمعها بواسطة تقنية المنظار أبسط من معدل جمع البويضات مباشرة من المبيض. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام تنظير البطن البيطري للتحقق من نمو المسام.
إدخال منظار البطن: أدخل المبزل الحاد في الكانيولا ، وأدخل القنية في المهبل ، ثم ضع الطرف الأمامي للقنية في الموضع المحدد مسبقًا من قبو المهبل من خلال قبضة المستقيم ، ثم اسحب المبزل غير الحاد ، وأدخل المبزل الهرمي ، و اضبط الزاوية. اجعل اتجاه المبزل والمحور الطويل للبقرة قليلاً إلى اليمين بزاوية 10 درجات ، واخترق قبو المهبل بقوة لأعلى. إذا انخفضت المقاومة فجأة فهذا يدل على ثقب في قبة المهبل. في هذا الوقت ، أخرج المبزل. عندما تسمع صوت دخول الهواء وتشعر اليد التي تمسك المستقيم بتمدد تجويف البطن في نفس الوقت ، فهذا يشير إلى أن وضع الثقب صحيح. يتم إدخال غلاف الفولاذ المقاوم للصدأ مع أسطوانة المنظار في الغلاف. وفقًا لشعور المستقيم ، إذا كان التجويف صغيرًا ، فيجب ملؤه ببعض ثاني أكسيد الكربون. يجب التحكم في سرعة سحب الهواء بشكل عام عند 7 ~ L / min. كمية الغاز المملوءة تعتمد على حجم البقرة."بشكل عام ، حوالي 9 لتر.
جمع البويضات: يجب على المشغل المستقيم ضبط موضع المنظار والمبيض باستمرار ، وعرض شكل البصيلات والجسم الأصفر في مواضع مختلفة على المبيض ، من أجل تحديد البصيلات التي تحتاج إلى ثقب. يقوم المساعد بإمساك كلمة مرور المشغل والبصيلة المعروضة على الشاشة وفقًا للمستقيم ، ويقوم بتشغيل إبرة البزل ، ويجمع السائل الجريبي ، ويضع السائل الجريبي في أنبوب التجميع الذي تمت إضافته بكمية صغيرة من سائل الثقافة. مساعد آخر مسؤول عن تشغيل مضخة فراغ القدم. من أجل منع فقدان البويضات ، يجب تشغيل مضخة التفريغ (يجب أن يكون الضغط السلبي 100 مم زئبق) قبل البزل. بعد التجميع ، يوضع السائل الجريبي في رف أنبوب الاختبار لمدة 5-10 دقائق ، ويتم امتصاص السائل الجريبي الموجود في قاع أنبوب التجميع في الصفيحة باستخدام القش ، ثم يتم ملاحظته تحت المجهر الضوئي. ويتم امتصاص البويضات المكتشفة في الأنبوب الرفيع. يتم إغلاق طرفي الأنبوب الرفيع ، ويمكن نقل البويضات إلى المختبر من أجل الثقافة الناضجة. بعد اكتمال العملية ، يتم إخراج برميل المنظار الداخلي ، ويضغط المساعدان على جانبي جدار بطن البقرة لطرد الغاز في تجويف البطن. عندما لا يتم تفريغ الغاز ، يتم إخراج الكانيولا وفحص المهبل كل يوم لمنع العدوى. يتم إغلاق طرفي الأنبوب الرفيع ، ويمكن نقل البويضات إلى المختبر من أجل الثقافة الناضجة. بعد اكتمال العملية ، يتم إخراج برميل المنظار الداخلي ، ويضغط المساعدان على جانبي جدار بطن البقرة لطرد الغاز في تجويف البطن. عندما لا يتم تفريغ الغاز ، يتم إخراج الكانيولا وفحص المهبل كل يوم لمنع العدوى. يتم إغلاق طرفي الأنبوب الرفيع ، ويمكن نقل البويضات إلى المختبر من أجل الثقافة الناضجة. بعد اكتمال العملية ، يتم إخراج برميل المنظار الداخلي ، ويضغط المساعدان على جانبي جدار بطن البقرة لطرد الغاز في تجويف البطن. عندما لا يتم تفريغ الغاز ، يتم إخراج الكانيولا وفحص المهبل كل يوم لمنع العدوى.
احتياطات:
1. التخدير: ليس ضحلًا جدًا أو عميقًا جدًا. التخدير الفعال شرط أساسي لاستكمال البزل الجريبي للحصول على البويضات. إذا كان التخدير سطحيًا جدًا ، ستشعر البقرة بالألم وسيؤثر ذلك على دقة العملية ، ويجب استكمال التخدير. إذا كان التخدير عميقًا جدًا ، فلن تقف البقرة بثبات أو حتى تستلقي ، مما سيؤثر أيضًا على العملية. إذا كانت البقرة مستلقية فيجب إيقاف العملية فورًا وسحب الكانيولا والأنبوب بالمنظار بسرعة. في الوقت نفسه ، يجب الانتباه إلى إطلاق Baoding في الوقت المناسب لتجنب إصابة البقرة.
2. ثقب: يجب أن يمسك ممسك المستقيم بزاوية البزل بشكل صحيح عند ثقب قبو المهبل لمنع ثقب المستقيم والأمعاء الغليظة. عند ثقب الجريب ، لا ينبغي ثقب الإبرة بعمق شديد ، وإلا فإنها ستضر بمادة المبيض وتسبب النزيف. لن يؤدي ذلك فقط إلى تلويث السائل الجريبي ، ويؤثر على اكتشاف البويضات ، ويمنع الإبر والقنوات ، بل يؤثر أيضًا على نمو البصيلات على المبيض. استعادة. في حالة النزيف ، يجب إيقاف ثقب الجريب على الفور ، ويجب استبدال الإبرة والقسطرة وأنبوب التجميع ، ويجب غسل الإبرة والقسطرة بمحلول ملحي 0.01 مجم هيبارين / مل قبل ثقب الجريب التالي.
3. جمع السائل الجريبي: يجب الاحتفاظ بالسائل الجريبي الذي تم جمعه عند درجة حرارة ثابتة قدر الإمكان. من الأفضل الكشف عن البويضات مباشرة بعد جمعها ، ووضعها في وسط استنبات ناضج يحتوي على FSH ، وتعبئتها في أنابيب رفيعة ونقلها إلى المختبر ، بشكل عام من الوقت من الحصاد إلى الحضانة لاستنبات النضج يجب ألا يتجاوز 4 ساعات.
4. المهارات: لا يتطلب الاستخدام الناجح لهذه الطريقة معدات جيدة فحسب ، بل يتطلب أيضًا أن يتمتع المشغل بمستوى عالٍ من المعرفة والكفاءة في التشغيل العملي ، فضلاً عن التعاون الوثيق مع اثنين من المساعدين. لذلك ، يجب إجراء التدريب اللازم قبل العملية التجريبية.
بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضًا استخدام هذه الطريقة للحصول على البويضات من الأبقار الصغيرة مقدمًا ، وبالتالي زيادة فترة الاستخدام والإمكانات الإنجابية للأبقار ، وتسريع التقدم الوراثي. ستكون هذه الطريقة طريقة جيدة للحصول على مصادر البيض بعد التبويض واستخدام المبايض المعزولة.
